【Hanson】白皮書：體外釋放測試(IVRT)在半固體外用制劑中的應用

01 引言

Introduction

體外釋放試驗(IVRT)在產品開發以及納米乳劑、懸浮劑、多囊脂質體和微球等復雜藥物產品的監管評估中日益受到關注和重視，因為 IVRT 提供了有關藥物產品的質量和性能的關鍵信息理想的 IRT 方法應能將藥物產品關鍵質量屬性(CaAs)的變化與藥物的釋放特性直接聯系起來，從而提供寶貴的信息，確保批次與批次之間的質量一致性，促進對批準后變化的評估，并協助進行產品比較，以支持生物等效性的確定。

IVRT 是文獻中列出的表征外用半固體制劑的方法之一。該測試并不一定與體內性能或生物利用度相關聯；但它能讓人深入了解產品性能以及因制劑特性而導致的產品性能變化。

02 IVRT 研究的重要性

Importance of IVRT study

• 評估成分變化對釋放速度的影響

• 粘度變化對釋放速度的影響

• 評估工藝參數的變化

• 在臨床 PK 或生物等效性研究之前篩選配方

• 比較批次配方，以評估擴大規模和批準后的變化

• 在某些情況下放棄對某些非專利制劑進行臨床終點研究

圖1. IVRT儀器-Teledyne Hanson Phoenix 干熱擴散測試系統和干熱擴散池

圖2. IVRT儀器的各個部分

03 項目亮點

PROJECT HIGHLIGHTS

• 為體外釋放試驗選擇合適的分析技術

• 優化樣品制備程序

• 成功解決方法開發過程中面臨的諸多挑戰

• 分析方法驗證

04 分析方法開發的復雜性

COMPLEXITY OF ANALYTICAL METHOD DEVELOPMENT

對藥物的物理和化學特性進行了制表和評估。IVRP 在評估任何可能影響產品質量和性能的批準后工藝變更方面發揮著非常重要的作用。浸泡池系統的自動化相對較容易。在這項研究中，我們開發了一種方法，它甚至可以檢測配方和生產過程中可能發生的微小變化，并驗證了該方法的準確性、可重復性和選擇性。在方法開發過程中，考慮并優化了以下步驟，以供進一步研究。

IVRT 方法是為檢測不同批次之間的差異而開發的，但如果產品發生任何可能影響性能的變化，IVRT 方法都能充分顯示出來。

a.受體介質的選擇

b.膜的選擇

c.選擇取樣時間點和重復介質實驗

d.測試與參考

A. 受體介質的選擇

如同行文獻所述，"可使用適當的受體介質，如水溶性藥物的水緩沖液或稀釋水溶性藥物的水醇介質”。因此，在確定基本檢測方法后，方法開發的首要任務是測量原料藥在幾種溶劑中的溶解度，從磷酸鹽緩沖溶液(PBS)等水溶液到異丙醇/PBS-50/50(v/v)等水醇溶液。目的是找出能在 IVRT 接收容器中提供沉降條件的溶劑。當受體介質具有相對"較高的溶解或帶走藥物的能力"，且受體介質"在試驗結束時超過 cs(藥物在釋放基質中的溶解度)的 10%"時，就會出現沉降條件。通常會選擇三種介質(包括水基和水醇基溶劑)進行進一步的NRT評估。至少必須保持沉降條件，受體溶液必須能夠容納超過最后一個取樣點釋放的物質量。理想情況下，受體溶液應能溶解 10 倍于測試期間釋放量的物質。例如，如果測試結束時釋放了 2 毫克產品，那么樣品池中的受體介質至少應能容納 2.1 毫克。受體介質蕞好能溶解 20 毫克?？墒褂玫牡湫腿軇┯幸译?、乙醇、甲醇和異丙醇與水混合。典型比例不應超過 80/20。應根據原料藥的溶解度和化學性質選擇溶劑。

使用不同介質進行溶解度分析：

表1. 溶解度研究結果

可接受的沉降條件是指實驗期間受體介質中活性物質的最大濃度不超過其在受體介質中最大溶解度的 30%。沉降條件通常發生在介質體積至少是飽和體積 3-10 倍的情況下。為實現線性釋放并檢查至少 70%的活性物質釋放情況，我們使用不同的介質進行了進一步的實驗。在受體介質 pH 值為 7.4 的磷酸鹽緩沖鹽水中觀察到了最大溶解度:乙醇(60:40)。在整個實驗過程中，均按照歐盟標準達到了沉降條件。

B. 膜的選擇

膜應確保產品和受體介質保持分離，以便確保測試配方在整個測試期間保持不變。膜不應限制活性物質的釋放速度。膜應與藥物產品配方兼容，不會與活性物質結合。膜有多種選擇，包括最近切除的組織、組織結構、尸體組織和合成膜。影響選擇適當膜的因素包括與測試材料的兼容性、可用性、可重復性、成本，以及重要的實驗目標本身。合成膜在孔徑、厚度和親水性方面的變化是可控的。由于許多半固體產品的主要成分是水，因此通常使用親水性/親水性合成膜。在膜篩選過程中，通常會評估三種具有相同孔徑的聚合膜。常用的膜有 Tuffryn Supor?(聚砜)、纖維素、Acetate Plus?(醋酸纖維素)、尼龍、聚四氟乙烯和聚碳酸酯。使用兩張含 100% 樣品的濾膜進行濾膜選擇。0.45 微米的聚碳酸酯 Nuclepore 膜過濾器和 0.45 微米的尼龍膜過濾器被用于開發研究，兩種膜獲得的結果幾乎相似。根據膜的可用性，進一步研究使用了0.45μ 尼龍膜過濾器。

C. 選擇取樣時間和重復介質實驗

為確保藥物的最大釋放量，在 30 分鐘到 6 小時的不同時間間隔內采集樣品，采集條件如下。

發現 RSD% 和回歸均在接受標準范圍內。所有樣本單元的斜率都在接受標準范圍內。6 小時后的釋放時間點達到飽和。為避免受體介質蒸發，所有的細胞培養皿都被封蓋。觀察到的結果顯示所研究的時間點也是線性的，并且釋放情況良好，結果如下。

表2. 試驗產品的 IVRT 藥物釋放曲線

圖3. 藥物釋放曲線

根據上述結果，所有單元的 RSD%、回歸和斜率都在接受標準之內。

05 IVRT 擴散池系統參數

IVRT DIFFUSION CELL SYSTEM PARAMETER

在上述試驗的基礎上，最終確定了以下條件供進一步分析。

D. 測試與參考

所開發的方法用于比較試驗產品和參照產品在以下條件下的釋放曲線，以顯示制劑等效性。

表3. 試驗產品和參照產品的 IVRT藥物釋放曲線

對測試和參照產品的生成結果進行統計評估，以確定配方的相同性（等效性）。

該產品是為歐洲市場開發的。因此，采用了 EMA 準則來驗證結果。根據 EMA 關于外用產品的質量和等效性的指南草案，測試產品和參照產品平均值比值的 90% 置信區間應在 90-111% 的接受區間內。上述結果符合接受區間，因此得出結論，試驗產品和參照產品是等效的。

方法驗證

驗證的目的是證明所使用的測試方法適合其預期目的，并建立文件證據，高度保證該方法在整個過程中產生一致和同步的結果，并符合預定的質量屬性。該方法針對以下參數進行了驗證。選擇性(空白和安慰劑干擾)、特異性、線性、精密度和準確度、回收率、膜惰性、中間精密度和劑量鑒別。

IVRT 方法驗證研究摘要

06 概述 SUMMARY

IVRT 是一種評估半固體藥物釋放的有效方法。IVRT 可作為產品開發過程中的一種方法，也可在貨架期研究期間評估產品質量，或作為批次放行的質量控制測試。它是將測試產品（仿制藥）與參比產品（參比上市藥物）進行比較以發現產品等效性的絕佳體外工具。Recipharm 已根據監管要求開發并驗證了 IVRT 方法。作為一家荃球性的 CDMO，Recipharm 能夠為不同地區的客戶提供產品開發、分析方法開發和驗證活動方面的支持。Phoenix RDS VDC 系統提供了令人滿意的結果，符合監管標準。

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